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QIAGEN RNeasy Mini Kit
從細(xì)胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA
RNeasy Mini Kit可從細(xì)胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA，硅膠膜RNeasy離心柱的結(jié)合能力達(dá)100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩(wěn)定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織?？稍赒IAcube全自動純化儀上應(yīng)用RNeasy Mini Kit實現(xiàn)RNA純化自動化。處理更小或更大的樣本，可使用RNeasy Micro Kit（離心柱結(jié)合能力為45 µg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA）和RNeasy Maxi Kit（離心柱結(jié)合能力為6 mg RNA）。
購買產(chǎn)品
貨號/ ID：74104 RNeasy迷你套件（50） 50個RNeasy微型旋轉(zhuǎn)柱，收集管（1.5 ml和2 ml），無RNase的試劑和緩沖液 |
貨號/ ID：74106 RNeasy迷你套件（250） 250個RNeasy微型旋轉(zhuǎn)柱，收集管（1.5 ml和2 ml），無RNase的試劑和緩沖液 |
RNeasy Mini Kit適用于分子生物學(xué)應(yīng)用。該產(chǎn)品不適用于疾病的診斷、預(yù)防或治療。
QIAGEN RNeasy Mini Kit
產(chǎn)品詳情
來自各種樣品的高質(zhì)量RNA。
甲醛瓊脂糖凝膠和使用RNeasy Maxi Kit純化的總RNA的Northern印跡。每個泳道上樣的是從每種來源分離出的總RNA（10 µg）。所有組織均來自小鼠。酵母：釀酒酵母；大腸桿菌菌株：HB101。32個P標(biāo)記的探針被識別為（G）GAPDH；（E）翻譯延伸因子EF-1α；（O）外膜蛋白A序列。（E和O分別由瑞士巴塞爾大學(xué)的P. Philippsen和德國圖賓根的馬克斯·普朗克生物學(xué)研究所的U. Henning分別提供。）未檢測到枯草芽孢桿菌。中號：0.24-9.5kb RNA階梯。胚胎，Huh7和HeLa細(xì)胞泳道中的7.5 kb帶（指示）是核前體RNA。
性能
RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動物或人類組織樣本，或從100–1 x 107個動物或人類細(xì)胞樣本或酵母中純化總RNA（參見"RT-PCR of RNA from as few as 100 cells"和"High-quality RNA from a variety of samples"）。
| 樣本來源 | 起始材料 | 平均產(chǎn)量（µg） |
|---|---|---|
| 動物細(xì)胞 LMH HeLa COS-7 淋巴細(xì)胞（未受激） | 1 x 10 6 1 x 10 6 1 x 10 6 1 x 10 6 | 12 15 35 0.5 |
| 小鼠組織 肝 肺 脾 | 10毫克 10毫克 10毫克 | 40 10 35 |
| 真菌細(xì)胞 S. cerevisiae | 1 x 10 7 | 25 |
原理
RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。
程序
RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個動物或人類細(xì)胞中、0.5–30 mg動物或人類組織中或小于5 x 107個酵母細(xì)胞中方便的純化總RNA。先對樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜（參見"RNeasy Mini spin column"）。RNA結(jié)合到膜上（多可結(jié)合100 µg），污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應(yīng)用，可在RNeasy操作過程中進(jìn)行柱上DNA酶處理，去除DNA殘留。之后可在30–100 µl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA（參見"RNeasy Mini procedure"）。還有各種特殊應(yīng)用的實驗方案可供選擇。
應(yīng)用領(lǐng)域
使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1（10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中），適用于多種下游應(yīng)用，包括：
Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡
終點(diǎn)式RT-PCR
定量real-time RT-PCR
芯片分析
Poly A+ RNA篩選
技術(shù)指標(biāo)
特征 | 技術(shù)指標(biāo) |
| 應(yīng)用 | PCR，qPCR，實時RT-PCR，微陣列 |
| 洗脫體積 | 30–100微升 |
| 規(guī)格 | 旋轉(zhuǎn)柱 |
| 主要樣本類型 | 組織，細(xì)胞 |
| 處理 | 手動（離心） |
| 純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | 總RNA |
| 樣本量 | 0.5–30毫克 |
| 技術(shù) | 二氧化硅技術(shù) |
| 每次運(yùn)行或制備時間 | 20分鐘 |
